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用免疫分析法(糖化血紅蛋白單克隆抗體)檢測HbA1c

用免疫測定法分析HbA1c

一種典型的方法是對葡萄糖和β-鏈的前5-10個氨基酸使用特異性抗體(通常是單克隆抗體)。這種抗體是乳膠涂層的。還有一種凝集劑,它是一種合成聚合物,具有抗體靶向的HbA1c部分的多個拷貝。凝集劑與抗體反應產生光散射和吸光度增加。

來自血液樣品的HbA1c然后與凝集劑競爭抗體膠乳結合位點,并因此減少光的散射和吸光度。所以血液中的HbA1c越大,散射光的吸光度越小。由此計算HbA1c的量,并且總血紅蛋白可以通過在血紅蛋白的Soret吸收帶處或附近(410-420nm)測量或通過在約540nm處通過Drabkins方法(氧化和轉化為氰化血紅蛋白)來測定,或者使用堿性血紅素試驗。

使用免疫測定程序的測定平臺包括:Siemens Healthcare Diagnostics DCA 2000和Advia 1650,Dimension,Roche Cobas和Hitachi以及Beckman分析儀。大多數對衰老或其他化學或自由基類型反應產生的血紅蛋白反應不會發(fā)生在HbA1c位點,而該方法組中的抗體所針對的位置是HbA1c位點。由于這個原因,這種類型的方法通常更容忍老化/降解反應,預計HbA1c對照比離子交換HPLC程序具有更長的可用重構或開放瓶時間。

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